尼泊金丁酯，又稱對羥基苯甲酸丁酯，屬對羥基苯甲酸酯類物質(zhì)，白色結(jié)晶，微有特殊氣味，溶于醇、醚和氯仿，難溶于水，口嘗時有麻舌感?？勺鳛橛袡C合成中間體。尼泊金丁酯外用安全性極高，已被廣泛作為殺菌防腐添加劑應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化妝品、膠片以及高檔產(chǎn)品領(lǐng)域。對大鼠、兔、狗、貓等的研究表明，尼泊金酯類物質(zhì)可經(jīng)胃腸道吸收，可以在體內(nèi)迅速代謝，無論是尼泊金酯類物質(zhì)或其代謝產(chǎn)物均不在體內(nèi)蓄積。尼泊金酯類的急性毒性為微毒，尼泊金丁酯皮下注射的半數(shù)致死量為16g/kg。先前的研究報道，尼泊金丁酯具有一定的抗細菌活性和抗真菌活性，但活性菌均較弱，目前，尚無關(guān)于尼泊金丁酯作為抗菌增效劑的報道。
小檗堿，也叫黃連素，原是從中藥川芍中提取的生物堿，目前可在多種草本植物中提取或人工合成，化學(xué)結(jié)構(gòu)為四甲基吡嗪，已被證實具有多種生物學(xué)功能，包括抗炎、抗氧化、抗微生物、免疫調(diào)控、控制血糖、心血管保護等功能，臨床用常常用于治療腹瀉、糖尿病及心血管等疾病。小檗堿也具有明顯的抗菌活性，小檗堿對革蘭氏陰性菌的抗菌活性較弱，最小抑菌濃度常常在512μg/mL以上，而對革蘭氏陽性的抗菌活性較強，最小抑菌濃度在128-512μg/mL之間。
尼泊金丁酯和小檗堿聯(lián)合使用對金黃色葡萄球菌的抑菌活性試驗
尼泊金丁酯和小檗堿聯(lián)合使用對病原菌的聯(lián)合用藥指數(shù)(FICI)測定：使用棋盤法測定尼泊金丁酯和小檗堿聯(lián)合應(yīng)用對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌ATCC 33591、犬臨床偽中間葡萄球菌菌株31A等菌株的FICI值。具體操作如下：
抗菌藥物尼泊金丁酯(作為甲藥)和小檗堿(作為乙藥)分別以各自的2MIC為最高濃度，使用MHB肉湯培養(yǎng)基倍比稀釋成8-11個濃度，分別沿96微孔培養(yǎng)板橫軸、縱軸加入含有不同濃度兩藥的MHB肉湯培養(yǎng)基50μL，然后分別加入各種病原菌菌液50μL，使最終每孔細菌數(shù)為2×105
CFU，37℃恒溫培養(yǎng)18～24h，觀察結(jié)果。記錄兩藥分別單用和聯(lián)用時各自的MIC，按下述公式計算FICI值(部分抑菌濃度指數(shù))。
FICI＝MIC甲藥聯(lián)合/MIC甲藥單用+MIC乙藥聯(lián)合/MIC乙藥單用
判斷標(biāo)準(zhǔn)：FICI≤0.5，協(xié)同作用；0.5＜FICI≤1，相加作用；1﹤FICI≤2，無關(guān)作用；FICI＞2，拮抗作用。即：尼泊金丁酯和小檗堿的FICI＝MIC(小檗堿聯(lián)合)/MIC(小檗堿單用)+MIC(尼泊金丁酯聯(lián)合)/MIC(尼泊金丁酯單用)。測定結(jié)果如表1所示：
表1尼泊金丁酯和小檗堿聯(lián)合使用對ATCC33591和犬臨床偽中間葡萄球菌菌株的抗菌作用
由表1可以看出：尼泊金丁酯和小檗堿單獨使用對MRSA33591的MIC分別為160μg/mL和1024μg/mL，二者聯(lián)合使用時的MIC分別為40μg/mL和128μg/mL，協(xié)同指數(shù)FICI為0.375。也即當(dāng)尼泊金丁酯與小檗堿的質(zhì)量比為1:3.2，兩者協(xié)同增效效果最好。
尼泊金丁酯和小檗堿單獨使用對犬臨床偽中間葡萄球菌菌株31A的MIC分別為160μg/mL和128μg/mL，二者聯(lián)合使用時的MIC分別為20μg/mL和32μg/mL，協(xié)同指數(shù)FICI為0.375。也即當(dāng)尼泊金丁酯與小檗堿的質(zhì)量比為1:1.6，兩者協(xié)同增效效果最好。
尼泊金丁酯和小檗堿單獨使用對犬臨床偽中間葡萄球菌菌株U6086的MIC分別為160μg/mL和256μg/mL，二者聯(lián)合使用時的MIC分別為40μg/mL和64μg/mL，協(xié)同指數(shù)FICI為0.375。也即當(dāng)尼泊金丁酯與小檗堿的質(zhì)量比為1:1.6，兩者協(xié)同增效效果最好。
本文通過棋盤法最小抑菌濃度試驗、體外細菌生長曲線和動物試驗證明尼泊金丁酯能夠顯著增強小檗堿的抗細菌活性和抗真菌活性，試驗中的細菌包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、犬貓源偽中間葡萄球菌；試驗中的真菌包括白色念珠菌。本實驗為尼泊金丁酯與小檗堿的聯(lián)合用藥開辟了一種新用途，能夠明顯提高小檗堿的抗細菌和抗真菌活性，其中，在治療多重耐藥革蘭氏陽性菌感染具有重要的臨床應(yīng)用價值。
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