高級(jí)醇(higher alcohols)俗稱“雜醇油”,是指含3個(gè)以上碳原子醇類的總稱,是釀酒發(fā)酵過程中產(chǎn)生的主要副產(chǎn)物,也是酒類主要風(fēng)味物質(zhì)之一。高級(jí)醇(雜醇油)的種類、含量與酒的口感、品質(zhì)有很大的關(guān)系。


高級(jí)醇具有強(qiáng)烈的刺激性氣味和味道,對(duì)酒精飲料的感官質(zhì)量和特性有重要影響。含適量高級(jí)醇的酒精飲料醇香,柔和,豐滿,并具有花束的協(xié)調(diào)性。當(dāng)高級(jí)醇的含量高于一定閾值時(shí),含酒精的飲料將具有雜醇油的味道并且強(qiáng)烈地令人陶醉。發(fā)酵過程中酵母產(chǎn)生的適量高級(jí)醇是影響中國黃酒質(zhì)量的最重要因素之一。研究人員從工業(yè)酵母菌株RY1構(gòu)建了BAT1和BAT2單基因和雙基因缺失突變體菌株,以減少中國黃酒發(fā)酵過程中的高級(jí)醇的產(chǎn)生。


應(yīng)用Bioscreen全自動(dòng)生長曲線分析系統(tǒng)對(duì)進(jìn)行了基因編輯的酵母菌株的生長性能進(jìn)行篩選。篩選結(jié)果表明,BAT2單基因缺失突變體菌株在高級(jí)醇的生產(chǎn)中產(chǎn)生了最大的改善,而其余部分則顯示出正常的生長和發(fā)酵特性。。此外,BAT2單基因缺失二倍體工程菌株RY1-Δbat2在中國黃酒的模擬發(fā)酵中,構(gòu)建并生產(chǎn)了低水平的異丁醇和異戊醇(異戊醇和活性戊醇),分別為92.40和303.31 mg/L,比親本菌株RY1降低了33.00和14.20%。該研究發(fā)現(xiàn)的酵母菌株的構(gòu)建對(duì)于中國葡萄酒行業(yè)的未來發(fā)展很重要,并為生成其他發(fā)酵酒精飲料的酵母菌株提供了見識(shí)。這項(xiàng)研究的結(jié)果為將來生產(chǎn)中國黃酒的工程菌株奠定了基礎(chǔ)。


Bioscreen全自動(dòng)生長曲線分析儀的應(yīng)用:將不同類型的酵母菌株和培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到Bioscreen生長曲線分析儀的蜂窩板中,使用Bioscreen自動(dòng)生長曲線分析系統(tǒng)于30°C下每1小時(shí)測定一次光密度(OD 600),獲得不同基因編輯后的酵母菌株的生長曲線。

圖1、單倍體酵母重組菌株及其親本菌株的生長曲線。通過在Bioscreen自動(dòng)生長曲線分析系統(tǒng)每1小時(shí)測量培養(yǎng)物的光密度(OD600),在30°C監(jiān)測不同類型的酵母菌株的生長曲線。


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